细胞凋亡检测的外部死亡受体途径
死亡受体(dr)属肿瘤坏死因子受体(tnfr)超家族,共同拥有富含cys的胞外结构域和胞内死亡结构域(dd)。
当死亡受体与特定的死亡配体结合后,其接收胞外的死亡信号,激活细胞内的凋亡机制,诱导细胞凋亡。
目前所知的死亡受体—配体主要有:
fas(apo-1、cd95)—fasl(cd95l)
tnfr1(dr1)—tnf
trailr1(dr4)—trail(apo-2l)
trailr2(dr5)—trail(apo-2l)
dr3(apo-3、tramp)—tl1a等
目前凋亡的死亡受体信号通路主要有3条:fas、tnfr1、trail。
fas信号通路
asl同源三聚体复合物与fas结合时启动fas—fasl介导的外部死亡受体途径的细胞凋亡。在信号传导的过程中,与配体结合的3个fas受体分子形成三聚体,细胞内的dd聚集成簇募集fadd、daxx、fap-1、flip等相关蛋白。
fadd通过死亡效应结构域ded募集pro-caspase8形成死亡诱导信号传导复合物(disc),disc中的pro-caspase8自我剪切成具有活性的caspase8。flip包含ded,能够整合到死亡受体的disc中,flip通过竞争性结合fadd上的ded或caspase8上的ded从而抑制pro-caspase8的激活。
在不同类型的细胞中caspase8激活caspase3的途径也有很大差异。
?在i型细胞中disc复合物激活大量的caspase8,caspase8激活caspase3,caspase3作用于各种可以引起细胞凋亡的底物,从而导致细胞凋亡;
?在ii型细胞中只有少量的caspase8被激活,活化的caspase8可以激活bid转化成tbid,tbid转移至线粒体膜,激活bcl-2家族促凋亡因子抑制bcl-2家族抗凋亡因子,通过线粒体途径接到细胞凋亡检测。
?此外,fas的dd结构域募集的daxx还可以激活jnk信号通路,通过线粒体途径和增强促凋亡基因例如p53、fas、fasl的转录表达介导细胞凋亡。
5 x 10^5 cells/vial 人脑微血管内皮细胞 hbmec
5 x 10^5 cells/vial 人脑血管平滑肌细胞 hbvsmc
5 x 10^5 cells/vial 人脑血管外膜成纤维细胞 hbvsmc
5 x 10^5 cells/vial 人脑血管周细胞 hbvp
5 x 10^5 cells/vial 人脉络丛内皮细胞 hcpec
5 x 10^5 cells/vial 人脉络丛上皮细胞 hcpepic
5 x 10^5 cells/vial 人脉络丛成纤维细胞 hcpf
5 x 10^5 cells/vial 人脑膜细胞 hmc
1 x 10^6 cells/vial 人神经细胞 hm
5 x 10^6 cells/vial 人神经细胞 hn
10 x 10^6 cells/vial 人神经细胞 hn
细胞凋亡检测